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核酸提取是各種分子生物學(xué)研究中的一項(xiàng)必要技術(shù)，核酸提取的主要步驟包括破碎樣本與核酸釋放、核酸分離與純化、核酸沉淀和洗滌。在進(jìn)行這些繁瑣的提取步驟中，操作不謹(jǐn)慎，會(huì)出現(xiàn)核酸（DNA/RNA）濃度低、有雜質(zhì)、核酸降解等問題，影響后續(xù)的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行。

離心柱法提取核酸流程圖（圖片來自于網(wǎng)絡(luò)）

為了解決以上問題，百邁客生物開發(fā)了一種簡(jiǎn)單、快速和高效的動(dòng)物核酸提取試劑盒?？梢詮膭?dòng)物組織、細(xì)胞、血漿樣本中快速提取總DNA&RNA，適用于后續(xù)PCR、 DNA文庫(kù)構(gòu)建、體外翻譯等各種分子實(shí)驗(yàn)。

Blood/Cell/Tissue DNA Kit
動(dòng)物DNA提取試劑盒

該試劑盒使用硅膠柱純化方式，含特殊的結(jié)合液/蛋白酶K，能迅速裂解細(xì)胞和滅活細(xì)胞內(nèi)核酸酶；可高效清除細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)?？梢詮膭?dòng)物組織、細(xì)胞、全血樣本中快速提取總DNA。

產(chǎn)品特點(diǎn)

改良配方：含特殊的結(jié)合液/蛋白酶K，能迅速裂解細(xì)胞和滅活細(xì)胞內(nèi)核酸酶；可高效清除細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)。

特殊純化：使用硅膠柱純化方式，提取過程中無需進(jìn)行耗時(shí)的醇類沉淀，并去除RNA、雜蛋白、脂類 及其他抑制性雜質(zhì)。

適用樣本豐富：適用各種血液、動(dòng)物細(xì)胞、動(dòng)物組織。

毒性?。禾崛∵^程中無需使用苯酚等有毒試劑。

結(jié)果展示

1.DNA濃度/純度檢測(cè)：提取不同動(dòng)物組織中的DNA，然后檢測(cè)DNA的濃度和吸光度。

結(jié)論：Qubit測(cè)得的DNA濃度較高；且A260/A280值在1.8~2.5之間，表明提取的DNA純度高。

表1：用Qubit檢測(cè)DNA的濃度，以及用Nanodrop檢測(cè)DNA在260 nm的吸光度。

2.DNA完整性檢測(cè)：提取50?mg不同組織中的DNA，然后凝膠電泳檢測(cè)完整性。

結(jié)論：條帶明亮清晰無拖尾現(xiàn)象，表明提取的血液、動(dòng)物組織、細(xì)胞的DNA完整性好。

圖1：將提取的DNA每孔上樣300 ng，瓊脂糖濃度為1%，70 V電壓，跑膠45 min。
Lane 1：λ-Hind Ⅲ DNA Marker ；Lane 2：雞血；Lane 3：人血；Lane 4：小鼠胃；Lane 5：
大鼠肺；Lane 6：小鼠脾臟；Lane 7：小鼠肝臟；Lane 8：Marker；Lane 9：果蠅；Lane 10：東亞飛蝗；Lane 11：石斑魚；Lane 12：白條地藤壺；Lane 13：λ-Hind Ⅲ DNA Marker。

 

Biomarker Cell/Tissue Total RNA Isolation Kit
動(dòng)物RNA提取試劑盒

該試劑盒中的裂解液RLT Plus能迅速裂解細(xì)胞和滅活細(xì)胞RNA酶的活性;且基因組清除柱能有效分離上清液并去除gDNA。提取的RNA純度高、質(zhì)量穩(wěn)定。適用于從動(dòng)物組織、細(xì)胞、樣本中快速提取總RNA。

產(chǎn)品特點(diǎn)

適用樣本豐富：可快速提取動(dòng)物組織、細(xì)胞、昆蟲等樣本總RNA。高效基因組DNA柱清除技術(shù)：可有效清除電泳可見gDNA殘留，提取的總RNA純度高，沒有基因組、蛋白和其它雜質(zhì)的污染。RNA純度高：可用于RT-PCR、qPCR、普通轉(zhuǎn)錄組測(cè)序、全長(zhǎng)轉(zhuǎn)錄組測(cè)序等下游實(shí)驗(yàn)。

結(jié)果展示

1.RNA濃度檢測(cè)：Nanodrop檢測(cè)A260/A280值在2.0左右，表明提取的RNA純度高，且濃度高。同時(shí)Agilent 2100生物分析儀檢測(cè)的RIN值接近10，表明RNA無降解，完整性好。

2.RNA完整性檢測(cè)：通過凝膠電泳檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)28S和18S條帶最明亮、清晰、條帶邊緣銳利，且28S條帶的亮度大概是18S條帶的兩倍或者以上，表明提取的RNA的完整性好。

圖2：將提取的RNA每孔上樣200 ng，瓊脂糖濃度為1%，180V電壓，跑膠20 min。
Lane 1：250 bp DNA Marker ；Lane 2：小鼠/子宮；Lane 3：小鼠/肺；Lane 4：小鼠胃；Lane 5：小鼠/心臟；Lane 6：果蠅。

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